培养基的配制
培养基、指供给微生物、植物或者动物(组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般含有碳水化合物、氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,
也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基种类很多、根据配制原料的来源可分为。
自然培养基、合成培养基、半合成培养基,根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基。根据培养基功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等。根据使用范围可分为细菌培养液、放线菌培养基、酵母菌培养基、真菌培养基等。培养基配置好后一般需要测试调节PH,还需要进行灭菌,通常使用高温和过滤灭菌。培养基由富含营养物质,容易被污染或变质,配好后不宜久放,最好现配现用。
培养基配置操作步骤:
1、配料:
配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量。
2、溶解:
淀粉溶解:少量冷水调成糊状。加热溶解,边加热边搅拌以防止烧焦。
3、调PH:
用1N的盐酸或1N的NaOH把培养基调节到所要求的值。
4、过滤:
滤纸或棉花进行过滤。
5、分装:
一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。
6、包扎:
分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。
7、灭菌:
按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏。
8、贮存:
培养基在30℃下放置一天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。