替卡西林的结构与细胞壁的成分粘肽结构中的D-丙氨酰-D-丙氨酸近似，可与后者竞争转肽酶，阻碍粘肽的形成，造成细胞壁的缺损，使细菌失去细胞壁的渗透屏障，对细菌起到杀灭作用。
对革兰阳性球菌及革兰阳性杆菌、螺旋体、梭状芽孢杆菌、放线菌以及部分拟杆菌有抗菌作用。
对溶血性链球菌等链球菌属，肺炎链球菌和不产青霉素酶的葡萄球菌具有良好抗菌
作用。对肠球菌有中等度抗菌作用，淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、白喉棒状杆菌、炭疽芽孢杆菌、牛型放线菌、念珠状链杆菌、李斯特菌、钩端螺旋体和梅毒螺旋体对该品敏感。
替卡西林对嗜血杆菌和百日咳鲍特氏菌亦具一定抗菌活性，其他革兰阴性需氧或兼性厌氧菌对该品敏感性差。
替卡西林对梭状芽孢杆菌属、消化链球菌、厌氧菌以及产黑色素拟杆菌等具良好抗菌作用，对脆弱拟杆菌的抗菌作用差。
替卡西林通过抑制细菌细胞壁四肽则链和五肽交连桥的结合而阻碍细胞壁合成而发挥杀菌作用。
替卡西林钠制作工艺
1.向异丙醚中加入3-噻吩丙二酸二乙酯，将混合液升温后再加入催化剂和二氯亚砜，定温反应后将反应液降温并减压浓缩，直至除去所有的过氧化物，最后将所得的反应液压入高位罐于0℃保存备用，
2.配制异辛酸钠/丙酮溶液，将配制好的溶液压入高位罐保存备用，
3.将6-氨基青霉烷酸溶于蒸馏水中，将其降温后，加入氢氧化钠使6-氨基青霉烷酸溶解，调节pH值后，再依次加入碳酸氢钠、丙酮及步骤、所制备的反应液，反应后，使溶液分相，保留水相，回收有机相，在水相中加入活性炭和过滤材料于低温下脱色，过滤，将滤饼洗涤后，合并滤液到反应罐，加入稀盐酸以及甲基异丁基酮，使溶液分相，保留有机相备用，
 4.将第三步所得的有机相加入第二步配制的异辛酸钠/丙酮溶液，调节pH值后加入晶种。
 5.将第四步结晶后的溶液过滤，用丙酮洗涤滤饼，将洗涤后的滤饼真空干燥，即得替卡西林单钠盐。
 6.替卡西林单钠盐和氢氧化钠配制成水溶液，加入活性炭于低温下脱色，无菌过滤，将滤液压滤至无菌室冻干即得替卡西林钠盐。