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2019-12-06
1. 取材:切取一小段需要的组织,组织块的规格为 3-5mm×3-5mm×10-15mm。
2. 固定:固定液用量一般为组织块体积的10-20倍。
3. 冲洗:固定12-24小时后,将材料自固定液中取出后,在70%酒精中换洗几次,可在酒精中加几滴氨水至洗去黄色为止。
4. 脱水:70%酒精→80%酒精→90%酒精→95%酒精→无水乙醇Ⅰ(→无水乙醇Ⅱ
5. 透明:无水乙醇与二甲苯溶液(1:1)→二甲苯Ⅰ→二甲苯Ⅱ
6.浸蜡:浸蜡的全过程应在恒温设备中进行,将恒温箱调至58℃。
二甲苯与石蜡混合液(1:1)→石蜡Ⅰ→石蜡Ⅱ浸蜡必须彻底,否则组织内残留透明剂会造成切片过程的困难和影响切片的质量。
7. 包埋:在盒内注入溶化的石蜡,将已浸蜡的组织块置入其内,使蜡块迅速冷却硬固,组织块在蜡块中可长期保存。
8. 切片:包埋后的组织块经修整后,用切片机切成5-7μm的石蜡带。
9. 粘片:将组织石蜡带在50摄氏度的温水中展片,然后用经1%氯化氢溶液处理干净的载玻片捞片,组织带即可粘在载玻片上。
10. 烤片:将粘好的载玻片置于35℃左右的温箱中烤干,待2-3小时。
11. 苏木精—伊红染色:将烤干的片进行染色。
 
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