蛋白酶K的应用介绍
2020-05-13
蛋白酶K是一种从白色念 珠菌分离出来的强力蛋白溶解酶,具有很高 的比活性,是DNA提取的关键试剂。该酶 在较广的pH范围(4〜12.5)内及高温 (50〜70°C)均有活性,用于质粒或基因组 DNA、RNA的分离。在DNA提取中,
主要作用:
酶解与核酸结合的组蛋白,使 DNA游离在溶液中,随后用不同方法进行 抽提,除去杂质,收集DNA。EDTA等螯 合剂或SDS等去垢剂均不能使之失活。蛋 白酶K贮存液一般为10mg/ml或20mg/ml。 贮存于一20°C。蛋白酶K溶液为无色透明, 如出现沉淀就不能再使用。
蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理,它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用,以增加探针与靶核酸结合的机会,提高杂交信号.但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时,都会对细胞的结构有一定的破坏,导致组织切片的脱落,细胞核的消失,从而影响杂交结果.EDTA缓冲液可以替代蛋白酶K的作用,解决上述出现的问题,并能达到理想的染色效果。
中文名称 | 蛋白酶K |
中文别名 | 蛋白酶K ;蛋白酶 K |
英文名称 | Proteinase K |
CAS | 39450-01-6 |
分子量 | mol wt 28.93 kDa |
作 用 | 生物样品中蛋白质的一般降解 |
定 义 | 一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶 |
酶解与核酸结合的组蛋白,使 DNA游离在溶液中,随后用不同方法进行 抽提,除去杂质,收集DNA。EDTA等螯 合剂或SDS等去垢剂均不能使之失活。蛋 白酶K贮存液一般为10mg/ml或20mg/ml。 贮存于一20°C。蛋白酶K溶液为无色透明, 如出现沉淀就不能再使用。
蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理,它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用,以增加探针与靶核酸结合的机会,提高杂交信号.但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时,都会对细胞的结构有一定的破坏,导致组织切片的脱落,细胞核的消失,从而影响杂交结果.EDTA缓冲液可以替代蛋白酶K的作用,解决上述出现的问题,并能达到理想的染色效果。