1.静脉取血2ml，加入含肝素溶液(10～50u／m1血样本)的试管中，混匀，使血液抗
凝。用pH7.2 Hanks液将抗凝血稀释1倍。
2.吸取2ml淋巴细胞分层液置于刻度离心管中，然后将离心管倾斜45O角，用毛细滴管将稀释的全血沿管壁缓慢加至分离液上面，应注意保持两者界面清晰。
3.在18℃～20℃下，用水平离心机以2000r/min离心20min。离心后细胞分布如图。
 4.用毛细吸管轻轻插到混浊带，沿管壁轻轻吸出此层细胞，移入另一支离心管中。即要吸取所有单个核细胞，又要避免吸取过多的分层液或血浆，以免混入其他细胞成分。
5.用Hanks液洗涤细胞3次。第一次2000r/min ，10 min；第2～3 次1500r/min ，10 min，可去掉大部分混杂的血小板。
6.将沉淀细胞悬于培养基中备用。